Introdução: A Doxorrubicina (DOX) é usada para tratamento de diferentes tipos de câncer. A multi-resistência a drogas (MRD) é o maior obstáculo para o sucesso do tratamento. Muitos são os radiofármacos utilizados na tentativa de mostrar o comportamento da DOX em tumores e o efeito de Pgp na MRD. Estudos recentes empregam o uso do PET, que é limitado por sua pouca disponibilidade em muitos países como também pelo radiofármaco, FDG-¹⁸F, não estar associado à MRD. Nosso grupo de pesquisa desenvolveu a marcação da DOX com ^99mTc e avaliou a sua incorporação em linhagens celulares sensíveis e resistentes. Foram selecionadas as linhagens derivadas de leucemia mieloide crônica – K562, sensível, e Lucena 1, resistente, que apresenta superexpressão de Pgp. A DOX é ativamente expulsa de células que superexpressam Pgp.

Material e métodos: A DOX foi marcada com 37 mBq de ^99mTcO4-. Os controles radioquímicos foram feitos em cromatografia em camada fina. Realizada a avaliação da estabilidade em diferentes tempos (5 min, 1h, 3h, 5h e 24h). Para a detecção de Pgp, foi utilizado anticorpo antiglicoproteína-P-FITC humana. Para avaliação da atividade de Pgp, as células K562 e Lucena 1, foram incubadas com Rodamina 123 na presença e ausência de Verapamil (VP), na presença de DOX ou DOX-^99mTc. As análises estatísticas foram realizadas por teste T Student da expressão e viabilidade de Pgp.

Resultados: A eficiência de marcação da DOX foi de 90% e se manteve estável nas primeiras 5 horas. A linhagem da Lucena 1 mostrou a superexpressão de Pgp que não foi observada na K562. Na avaliação com Rodamina a K562 apresentou aumento de fluorescência intracelular enquanto a Lucena 1 aumentou minimamente. A diminuição da viabilidade celular pela DOX foi de 19±15% e pela DOX-^99mTc de 11±16%, sendo mantido assim o potencial citotóxico de ambas. Os efeitos produzidos pela droga não-marcada e marcada na linhagem Lucena 1 não foram estatisticamente significativos. A exposição ao VP puro não alterou a viabilidade das linhagens celulares. Na presença de DOX ou DOX-^99mTc e VP simultaneamente, a Lucena 1 apresentou diminuição significativa na viabilidade celular, sugerindo que a resistência a DOX ou DOX-^99mTc pode ser revertida por um inibidor de Pgp. As células não se mostraram radiossensíveis com a quantidade de radionuclídeo presente na molécula, o que pode ser observado na incubação das células MRD com a DOX-^99mTc. A citotoxicidade foi observada somente quando a droga foi internalizada.

Conclusão: Foi comprovada a estabilidade da marcação da DOX com o ^99mTc, nas culturas celulares, assim como a sua capacidade de substrato da Pgp.